Säännöt verityypin määrittämiseksi ABO-järjestelmän mukaisesti

Menetelmä veriryhmien määrittämiseksi ABO-järjestelmän mukaisestion tunnistaa antigeenit A ja B erytrosyytteihin käyttämällä tavanomaisia ​​vasta-aineita ja agglutiniinien käyttämistä veressä olevan plasman tai seerumin veressä. Tekniikka kehitettiin 1900-luvun alussa ja sitä käytetään edelleen aktiivisesti lääketieteessä. Antigeenien A ja B määritys johtuu anti-A- ja anti-B-zeolitoneista.

Peruskäsitteet

Luovuttajat määrittävät paitsi antigeeniterytrosyytteihin, mutta myös agglutiniineihin seerumissa (plasmassa), käyttäen normaaleja erytrosyyttejä. Laskimoveria käytetään biomateriaalina. Ennen testiä sinun on luovuttava rasvaisista elintarvikkeista päivää ennen testiä ja älä tupakoi puoli tuntia ennen testiä. Veriryhmät määritetään kahdesti: ensin hoito-osastolla, jossa materiaali kerätään, ja sitten vahvistetaan laboratoriotutkimuksella.

Veriryhmien määritelmä ABO - järjestelmän mukaan ontärkein transfuusioon käytetty testi. Myös eräissä eläimissä on samanlainen veriryhmä, esimerkiksi simpansseja, gorilloja ja bonoboja.

Historian löytö

Tieteessä on yleisesti hyväksytty käsitys siitä, ettäABO-järjestelmän mukaisten veriryhmien määritysmenetelmä paljasti ensin Itävallan tiedemies Karl Landsteiner vuonna 1900. Sitten hän kuvaili työstään kolmea antigeenityyppiä. Tätä kolmekymmentä vuotta hänelle myönnettiin Nobel-palkinto lääketieteessä ja fysiologiassa. Johtuen siitä, että välillä tutkijat eivät olleet läheiset, ja myöhemmin todettiin, että Tšekin lääkärin Jan Jansky serologiaa riippumatta tutkimuksen Karl Landsteinerin kuvattiin ensimmäisen kerran neljää ihmisen verta, mutta tutkimuksia ei ole tunnettu suurelle yleisölle. Tällä hetkellä J. Jansky on kehittänyt luokituksen, jota sovelletaan Venäjällä ja entisen Neuvostoliiton tasavallassa. Yhdysvalloissa WL Moss loi samanlaisen työn vuonna 1910.

Menetelmä veriryhmien määrittämiseksi ABO-järjestelmän mukaisesti tsoliklonovin avulla

Veriryhmä on määritettävä sisätiloissahyvä valaistus lämpötila-alueella 15-25 astetta, koska poikkeamat tästä normista voivat vaikuttaa tutkimuksen tuloksiin. Potilaan kirjaimet ja sukunimi on kirjoitettu levylle tai lautaselle. Vasemmalta oikealle tai ympyrän ympärille sovelletaan ryhmien (O (I), A (II), B (III)) standardinimitystä. Sen alla, asianmukaiset seerumit sijoitetaan pisaroittain erillisillä pipeteillä jokaiselle lajille. Sitten potilaan verta lisätään niihin. Tutkimusmateriaali on otettu korvakorusta tai sormesta. Tämä edellyttää ABO-järjestelmän mukaisen veriryhmän määrittämistä.

Erytrosyyttien,jotka ovat putkessa hyytymuodon jälkeen. On tarpeen, että seerumin määrä on enemmän kuin lisätyn veren määrä kymmenkertaisena. Tämän jälkeen tippaa sekoitetaan lasipallojen kanssa (erikseen jokaiselle). Viiden minuutin aikana heiluttaen levyä varovasti, tarkkailemalla hemagglutinaatioreaktion ilmettä. Se on tosiasia, että pienet punaiset palat, jotka yhdistyvät suurempiksi. Seerumi tällä kertaa melkein kokonaan menettää värin.

Väärien hemagglutinaatioiden poistamiseksierytrosyyttien yksinkertainen liimaus, on tarpeen lisätä yksi pisara fysiologista liuosta kolmen minuutin kuluttua ja tarkistaa, onko agglutinaatio edelleen. Jos näin on, niin se on totta. Kaikki, ABO-järjestelmän mukaisten veriryhmien määritelmä tähän on päättynyt.

Tulosten tulkinta

Tämän seurauksena voi olla neljä reaktiota:

• ei ole agglutinaatiota minkä tahansa seerumin - ensimmäisen O (I) -ryhmän kanssa;
• reaktio ilmeni seerumeilla I (ab) ja III (a) - toisella ryhmällä A (II);
• agglutinaatio tapahtuu seerumeilla I (ab) ja II (b) - kolmannella ryhmällä B (III);
• jos reaktio tapahtuu kolmen seerumin kanssa,On tarpeen suorittaa lisämenetelmä AB (IV) -ryhmäreagenssien kanssa, jotka ovat standardit; jos tällaista pudotusta ei ole agglutinaatiota, voimme olettaa, että tämä on neljäs veriryhmä AB (IV).

Express-menetelmä Rh-tekijälle

ABO-järjestelmän mukaisten veriryhmien määritysmenetelmä edellyttää Rh-tekijän (Rh) samanaikaista tunnistamista.

Levyn pinta esikyllästetään jahe kirjoittavat siihen "kontrolli seerumi" ja "antiresus seerumi". Sitten yksi tai kaksi pisaraa tarvittavia reagensseja sijoitetaan merkintöjen alla ja analysoitava aine lisätään niihin. Tätä varten voit myös käyttää verta sormen (samassa määrin kuin seerumin tilavuudella) tai punasolujen jäljellä putken pohjalla sen jälkeen, kun hyytymän ilmestyminen (puolet seerumin tilavuudesta). Materiaalin valinta lopputulokseen ei vaikuta. Sitten veri ja seerumi sekoittuvat kuivan lasitangon kanssa, minkä jälkeen ne odottavat, että reaktio tapahtuu viiden minuutin ajan. Väärien lukemien poistamiseksi kolmen tai neljän minuutin kuluttua lisätään natriumkloridin (vain muutama tippa) isotooninen liuos. ABO- ja Rh-järjestelmän mukaisen veriryhmän määritys suoritetaan usein.

Jos erytrosyyttien agglutinaatio pudotusvalmisteessa onseerumi esiintyy, tämä osoittaa positiivista Rhesus-verta. Tilastojen mukaan Rh + esiintyy 85 prosentilla maailman väestöstä. Sen puute antaa meille mahdollisuuden puhua Rh-negatiivisesta liittymisestä. Jos agglutinaatio ilmestyi kontrolliseerumissa, se on tullut käyttökelvottomaksi. Valitettavasti algoritmi ABO-järjestelmän mukaisen veriryhmän määrittämiseksi ei aina toimi täydellisesti.

Mitä virheitä tällä tekniikalla voidaan tehdä?

Epätarkkuudet tiettyyn ryhmään kuuluvan veren määrittämiseen riippuvat seuraavista syistä:

• Tekninen.
• Veren biologinen spesifisyys.
• Vakioerojen ja punasolujen epätäydellinen luonne.

Tekniset virheet

Mahdolliset virheet ABO-järjestelmän veriryhmän määrittämisessä ristiin:

• Väärä seerumi levylle.
• Materiaalin virheelliset määrälliset mittasuhteet.
• Epäpuhtaiden levyjen käyttö tailevyt, jotka tulevat kosketukseen veren kanssa (jokainen seerumi on kerättävä erillisellä pipetillä, joka pestiin natriumkloridin liuoksella (konsentraatiolla 0,9%).
• Virheellinen tietue analysoidusta materiaalista.
• Määräajan noudattamatta jättäminenagglutinaation alkaminen - ei ole välttämätöntä kiirehtiä ja ottaa huomioon reaktio ennen viiden minuutin kuluttua, koska veressä voi olla heikkoja agglutinoeneja. Liiallistaminen ei ole myöskään välttämätöntä, koska pudot voivat kuivua reunoilta ja johtaa vääriin johtopäätöksiin. On tärkeää noudattaa ABO-järjestelmän mukaisia ​​veriryhmän määrittämistä koskevia sääntöjä.
  
• Epäonnistunut sentrifugointi voi myös johtaa vääriin tuloksiin.
• Ilman lämpötila ylittää sallitun,vaikuttaa agglutinaation puuttumiseen. Tällaisten virheiden välttämiseksi sinun on käytettävä erityistä seerumia, joka on suunniteltu toimimaan kuumassa ilmastossa. Määritä veriryhmät levylle tai levylle, jonka ulkopinta putoaa kylmään veteen.

Biologiset spesifisyysvirheet

Analyysin kohteena olevan veren biologiseen spesifisyyteen liittyvät virheet jaetaan kahteen tyyppiin.

• Riippuu punasolujen ominaisuuksista.
• Seerumin biologisiin ominaisuuksiin liittyvät virheet.

Tarkastellaan jokaista lajia tarkemmin.

Riippuu punasolujen ominaisuuksista

• Myöhäinen agglutinaatio, johtuen "heikosta"erytrosyyttien ja antigeenien muodot. Virheiden välttämiseksi on tarpeen määrittää luovuttajien ja vastaanottajien veriryhmä käyttäen normaaleja erytrosyyttejä. Tunnista agglutinogeeni A₂ tulisi tutkia uudelleen muuntyyppisten reagenssien ja muiden astioiden kanssa lisäämällä reaktion tallennusaikaa.
• "Panagglutination" ("autoagglutination") - taitoverta näyttäisi saman epäspesifisen luonteen reaktion kaikkien seerumien kanssa, myös sen omalla. Viiden minuutin kuluttua tällaisen agglutinaation voimakkuus heikkenee, vaikkakin sen pitäisi voimistua. Samankaltaisia ​​tapauksia havaitaan syöpäpotilailla poltettuna jne. Kontrollina on arvioitava analysoitujen erytrosyyttien agglutinaation ilmentyminen neljännen ryhmän ja suolaliuoksen standardiseerumissa. "Panagglutinaatiossa" veriryhmä määräytyy erytrosyyttien kolminkertaisen pesun seurauksena. Jos se ei anna toivottua tulosta, on syytä ottaa näytteitä verinäytteestä esilämmitetyssä putkessa ja sijoittaa näyte lämpösäiliöön, joka auttaa ylläpitämään lämpötilaa 37 astetta tai yli. Sen jälkeen se tulee toimittaa laboratorioon, jossa edellä mainittua lämpötilaa ylläpidetään ja kuumennetaan fysiologista suolaliuosta, levyä ja reagensseja.

• Joskus veren punasoluja analysoidaanon järjestetty "kolikoiksi", ja ne voidaan ottaa agglutinaateiksi. Jos lisäät kaksi pisaraa isotonista liuosta ja ravista kevyesti levyä, punasolut ottavat oikean aseman.
• Epätäydellinen tai sekoitettu agglutinaatio esiintyy potilailla, joilla on toinen, kolmas ja neljäs ryhmä luuydinsiirron seurauksena tai ensimmäisten kolmen kuukauden aikana verensiirron jälkeen 0 (I).

Seerumin biologisten ominaisuuksien vuoksi

• Rutiininomainen testaus seurauksenaaiempi herkistyminen paljasti erilaisen spesifisyyden vasta-aineita. Meidän on määritettävä se ja otettava vastaan ​​punasoluja ilman antigeenin sisältöä, johon immunisointi havaitaan. Vastaanottajan on ehdottomasti valittava yhteensopiva luovuttaja verta erikseen.
• Ei ole vasta-aineita A ja B, joita havaitaan vastasyntyneillä ja potilailla, jotka kärsivät humoraalisen immuniteetin alistamisesta.
• Kun muodostetaan "kolikot" epäselväksitulos on vahvistettava ottamalla ensimmäisen ryhmän tavalliset punasolut. Natriumkloridin liuos ja levyn kiihtyminen auttavat erottamaan todelliset agglutinaatit ja "kolikot".
  

Virheitä, jotka liittyvät huonomman standardin erytrosyyttien ja seerumien käyttöön

Heikot seerumit, joiden säilyvyys on ohi, tai joiden titteri on alle 1:32, voivat aloittaa heikon ja myöhäisen agglutinaation. Tällaisten reagenssien käyttöä ei voida hyväksyä.

Epäkelpoisten standardien punasolujen käyttötai heraa, joka on valmistettu ei-steriileissä olosuhteissa ja joka on säilytetty riittämättömällä tavalla, johtaa bakteerien agglutinaatioon, joka ei ole spesifinen luonteeltaan.

On monia suosittuja oletuksiaABO-järjestelmän veriryhmät, jotka ilmestyivät välittömästi sen havaitsemisen jälkeen eri maailman kulttuureissa. Esimerkiksi 30s viime vuosisadan Japanissa ja joissakin muissa maissa saivat suosittu teoria yhdistävä veriryhmä tietyn persoonallisuuden tyyppi. Samanlaiset teoriat ovat suosittuja tänään.

On myös sitä mieltä, että henkilöllä, jolla on ryhmä A, on vakava krapula, O liittyy hyviin hampaisiin ja ryhmä A2 - korkein älykäs taso. Mutta tällaisia ​​väitteitä ei ole tieteellisesti todistettu.

Tarkastelimme veriryhmien määritelmää ABO-järjestelmän avulla käyttäen standardiseerumeita.